Семинары и конференции 2017
Предельные фиксированные цены на лек. средс.
Спортивная медицина
Мед.товары на экспорт
Новости
Полезные статьи
Будь здоров!
Объявления
Отзывы и пожелания
Медицинские печатные издания
Вход в личный кабинет
Логин:
Пароль:
01.12.2007

Инструкция по микробиологическому и биологическому контролю в аптеках

Публикации  »  Публикации  »  Нормативно-правовые акты  »  Регулирование деятельности аптечных учреждений
   Преамбула
   1. Объекты бактериологического контроля
   2. Отбор проб
   3. Методика исследования
   4. Исследование смывов
   5. Исследование на стерильность
   6. Исследование на пирогенность
   7. Другие исследования
   Приложение N 1. Нормативы предельно-допустимого содержания
   непатогенных микроорганизмов в лекарственных формах аптек
   Приложение N 2. Расчет числа микроорганизмов в 1 куб. м
   воздуха при заборе материала седиментационным методом
   Приложение N 3. Критерии оценки микробной обсеменности
   воздуха помещений аптек
   Приложение N 4. Соблюдение режима стерилизации
   Приложение N 5. Питательные среды, применяемые
   для контроля стерильности (индивидуальное приготовление)
   Приложение N 6. Перечень нормативно-методических материалов
   Приложение N 7. План-схема микробиологического исследования

   Настоящая инструкция преследует цель повышения эффективности проведения микробиологического контроля за режимом в аптеках, связанных с приготовлением лекарственных форм, применяемых населением, как в виде инъекционных растворов, так и др. лекарственных форм.
   Данные указания представляют дополненные по некоторым показателям (исследования на стерильность и исследования на пирогенность) "Методические указания по микробиологическому контролю в аптеках" N 3182-84 от 29.12.1984 г.
   Внедрение данных методических указаний будет способствовать улучшению текущего санитарного надзора за режимом аптек в Республике Узбекистан, повышению требований Госстандарта.
   Лекарственные средства для инъекций в аптеках должны изготавливаться в асептических условиях.
   Санитарные требования к созданию асептических условий к получению воды для инъекций приведены в СанПине N 0078-98 МЗ РУз.
   Кратность обследования аптек ЦГСЭН с отбором проб на микробиологические исследования 2 раза в квартал; 1 раз в месяц баклабораториями ЛПУ.
   Данная "Инструкция по биологическому и микробиологическому контролю в аптеках" 2002 г. содержит следующие приложения:
   N 1 - Нормативы предельно допустимого содержания не патогенных микроорганизмов в лекарственных формах аптек в 1 куб. см;
   N 2 - Расчет числа микроорганизмов в 1 куб. м воздуха при заборе материала седиментационным методом;
   N 3 - Критерии оценки микробной обсемененности воздуха в помещениях аптек;
   N 4 - Соблюдение режима стерилизации;
   N 5 - Питательные среды, применяемые для контроля стерильности. Рецепты их индивидуального приготовления;
   N 6 - Перечень нормативно-методической документации, использованной при составлении "Инструкции по биологическому и микробиологическому контролю в аптеках" 2002 года;
   N 7 - План-схема микробиологического исследования в соответствии с "Инструкцией по биологическому и микробиологическому контролю в аптеках" 2002 г.

1. ОБЪЕКТЫ БАКТЕРИОЛОГИЧЕСКОГО КОНТРОЛЯ


   Объектами бактериологических исследований являются:
   1.1. Вода очищенная (см. стр.22 пункт 3) и вода для инъекций.
   1.2. Инъекционные растворы до стерилизации.
   1.3. Инъекционные растворы после стерилизации
   1.4. Глазные капли после стерилизации.
   1.5. Глазные капли, приготовленные в асептических условиях.
   1.6. Субстанции (сухие лекарственные вещества), используемые для приготовления инъекционных растворов.
   1.7. Аптечная посуда; пробки, прокладки, и прочие вспомогательные материалы.
   1.8. Инвентарь, оборудование, руки и санитарная одежда персонала.
   1.9. Воздушная среда.

2. ОТБОР ПРОБ


   Отбор проб для исследования производят сотрудники ЦГСЭН, а при проведении исследований в лечебно-профилактических учреждениях - работники бактериологической лаборатории данного ЛПУ.

   2.1. Пробы воды очищенной, используемой для приготовления лекарственных средств (кроме лекарств для инъекций и глазных капель) отбирают в количестве 500 куб. см в стерильные бутылки, с последующим закрытием ватными пробками и бумажными колпачками. Пробы отбирают из бюретки, конец которой предварительно обжигают ватой, смоченной спиртом. При неудовлетворительных результатах анализа отбор пробы проводят из приемника.
   При наличии в аптеке трубопровода для воды очищенной, отбор проб осуществляют из бюретки над столом ассистента и материальной комнаты.
   Для оценки санитарного содержания трубопровода, выемки воды очищенной производят непосредственно из трубопровода и затем из бюреток.
   Оценка результатов бактериологического исследования производится в соответствии с требованиями УзГосстандарта 950 -2000 "Вода питьевая".

   2.2. Пробы воды для инъекций, используемой для приготовления инъекционных растворов и глазных капель, отбирают в стерильные флаконы в количестве 1 единицы до 450 мл непосредственно в емкости, в которых осуществляется стерилизация.

   2.3. Инъекционные растворы (до стерилизации) отбирают во время их приготовления, но не позднее полутора часов и доставляют в лабораторию в тех же флаконах, в которых они будут подвергнуты стерилизации.

   2.4. Инъекционные растворы, глазные капли после стерилизации и приготовленные асептическим способом доставляют в аптечной упаковке в количестве 1 единицы.

   2.5. Глазные капли из торгового зала аптек доставляют непосредственно во флаконах, отпускаемых в лечебно-профилактические учреждения и населению. Целесообразно отбирать глазные капли 3-4 наименований, как со стола ассистента, так и прилавка.

   2.6. Отбор субстанций (сухих лекарственных веществ) проводят стерильными ложками в стерильную посуду лаборатории в количестве 30-50 г.

   В случае если вещество таблетированное, то отбирают фламбированным пинцетом в стерильную посуду лаборатории в количестве (30-50 г), по показаниям.

   2.7. Аптечную посуду, подготовленную для разлива инъекционных растворов и глазных капель, отбирают в момент приготовления их, в количестве трех штук одинаковой емкости. Флаконы доставляют в лабораторию в укупоренном виде, используя при этом пробки и прокладки, для отпуска лекарственных средств.

   2.8. Пробки (корковые, резиновые, полиэтиленовые) и прокладки отбирают в момент приготовления инъекционных растворов и глазных капель пинцетом после фламбирования и помещают по пять штук в широкогорлые стерильные колбы или банки с последующим закрытием стерильными ватно-марлевыми пробками и бумажными колпачками.

   2.9. Фильтровальные воронки, пипетки, мерные колбы, цилиндры, используемые для приготовления инъекционных растворов, контролируют путем ополаскивания их 10 куб. см стерильной водопроводной воды.

   2.10. Используемые в аптеках пипетки прополаскивают несколько раз в пробирке, содержащей 10 куб. см стерильной водопроводной воды, пробирки со смывной жидкостью доставляют в лаборатории для исследования.

   2.11. Смывы с инвентаря, оборудования, рук санитарной одежды персонала аптеки осуществляют с помощью ватных тампонов, помещенными в пробирки с 2 куб. см 0,9% раствора натрия хлорида или 0,1% пептонной воды.

   2.12. Пробы воздуха отбирают в следующих помещениях:
    - в асептическом блоке;
    - в ассистентской, фасовочной и материальной.
   Отбор проб воздуха производят при соблюдении следующих условий:
    - чистое подготовленное к работе помещение;
    - закрытые форточки и двери;
    - определение в помещении % относительной влажности воздуха;
    - уровень высоты отбора проб воздуха - соответствует высоте рабочего стола;
    - не ранее чем за 30 мин. после влажной уборки помещения.

   Пробы воздуха отбирают аспирационным методом с помощью приборов для бактериологического анализа воздуха: модель 818 (прибор Кротова), ПОВ, ПАЕ. Скорость протягивания воздуха должна составлять 25 литров в минуту, количество пропущенного воздуха - 100 литров для определения общего количества бактерий: 250 литров для определения золотистого стафилококка и 250 литров для определения плесневых и дрожжевых грибов. При невозможности использования аппарата Кротова разрешается применять седиментационный метод по Омелянскому Б.П. См. приказ 155 МЗ РУз (приложение 2).
   Для определения общего содержания бактерий в 1 куб. м отбор производят на 2% питательный агар, разлитый в чашки по 12-15 мл. Для определения золотистого стафилококка используют желточно-солевой агар, для определения плесневых и дрожжевых грибов - среду Сабуро.

3. МЕТОДИКА ИССЛЕДОВАНИЯ


   3.1. Исследования воды очищенной, используемой для приготовления лекарственных средств (кроме лекарств для инъекций и глазных капель).

   3.1.1. Определение количества мезофильных аэробных и факультативных анаэробных бактерий в 1 куб. см воды очищенной.
   Исследуемую воду вносят по 1 куб. см в две параллельные чашки Петри, которые затем заливают питательным агаром и выдерживают 24 часа при температуре 37°С и 24 часа при комнатной температуре. После этого подсчитывают число выросших колоний, как на поверхности, так и внутри питательного агара.
   Подсчет колоний проводится обязательно с помощью лупы, так как колонии бактерий даже после 48-часового инкубирования могут быть настолько мелкими, что невооруженным глазом не видны.
   При вычислении результатов анализа выводят среднее арифметическое из числа колоний, выросших на обеих чашках.
   Для выявления плесневых и дрожжевых грибов засевают по 0,5 куб. см исследуемой воды на поверхность двух чашек Петри со средой Сабуро и инкубируют при температуре 22°С в течение 3-4 суток. Затем подсчитывают число колоний плесневых и дрожжевых грибов на обеих чашках.
   Результаты оценивают по общему количеству непатогенных микроорганизмов, путем суммирования числа бактерий, выросших на чашках с питательным агаром и на среде Сабуро (Приложение 1).

   3.1.2. Определение бактерий группы кишечной палочки (УзГосстандарт 950-2000 "Вода питьевая").

   3.2. Исследование воды для инъекций для приготовления инъекционных растворов и глазных капель, инъекционных растворов до стерилизации приготовленных в асептических условиях на стерильных основах.

   3.2.1. Определение количества мезофильных аэробов и факультативных анаэробов (КОЕ МАФАМ) производят в соответствии с пунктом 3.1.1.

   3.2.2. Определение наличия бактерий группы кишечных палочек 1,0 куб. см лекарственные средства засевают в количестве 1 г (куб. см) на 9 куб. см 1% глюкозопептонной среды или среды Кесслера. Посевы выращивают при температуре 37°С в течение 18-24 часов с дальнейшим высевом секторами на среду Эндо, последнюю инкубируют при температуре 37°С 18-24 часа и проводят просмотр посевов. Из красных с металлическим блеском подозрительных колонии делают мазки, красят по Граму и микроскопируют. При наличии грам - отрицательных палочек, оставшуюся часть колоний пересевают на глюкозо-пептонную среду с поплавком, инкубируют при 37°С в течение 18-24 часов. Наличие кислоты и газа на глюкозоптонной среде обуславливает содержание бактерии группы кишечных палочек.

   3.2.3. Количественное определение бактерий группы кишечных палочек, 1 г (куб. см) лекарственных средств засевают на чашку и заливают средой Эндо, т.е. применяют глубинный метод посева. После инкубации посевов при температуре 37°С в течение 18-24 часов учитывают типичные колонии для бактерий группы кишечной палочки.

   3.3 Исследование субстанций (сухих лекарственных веществ), используемых для приготовления инъекционных растворов и глазных капель.
   Исследования проводят в случаях неоднократных неудовлетворительных бактериологических анализов, превышение норм предельно-допустимого содержания непатогенных микроорганизмов, (УзГосстандарта 950-2000 "Вода питьевая"), при удовлетворительных результатах анализов воды, используемой для их приготовления, при удовлетворительных данных бактериологического контроля посуды, флаконов, пробок, прокладок. Результаты, полученные при исследовании сухих лекарственных веществ служат одним из оснований для выбора партии при приготовлении инъекционных растворов.
   Сухие лекарственные вещества разводятся стерильной водой для инъекции с целью создания соответствующих концентраций инъекционным растворам и глазным каплям изготовляемых в аптеках. Объем и методика исследования приготовленных растворов см. пункт 3.2.
   Результаты, полученные при исследовании сухих веществ в растворах должны соответствовать нормативу, приведенному в приложении N 1; такие же требования предъявляются к глазным каплям, приготовленным в асептических условиях на стерильной основе.

   3.4. Исследования аптечной посуды, пробок, прокладок, воронок, цилиндров.

   3.4.1. Подготовка к исследованию.
   Три одноименных флакона, доставленные в лабораторию последовательно ополаскивают в 10 куб. см стерильной водопроводной воды. Воду из флакона во флакон переливают над пламенем горелки, тщательно споласкивая каждый флакон.
   В банки или широкогорлые колбы с доставленными пробками и прокладками наливают 10 куб. см стерильной водопроводной воды и тщательно споласкивают.
   3.4.2. Определение в смывной жидкости:
    - количества мезофильных аэробных и факультативно анаэробных бактерий (см. пункт 3.1). Число колоний, установленное в 1 куб. см смывной жидкости умножают на 10, что соответствует содержанию бактерий на всей смывной поверхности трех одноименных предметов;
    - определение наличия бактерий группы кишечных палочек 8 куб. см оставшейся смывной жидкости засевают в 1 куб. см концентрированной глюкозопептонной среды и инкубируют при температуре 37°С в течение 18 -24 часов.
   Дальнейший ход исследования и идентификацию бактерий группы кишечных палочек проводят по пункту 3.1.

   3.4.3. Интерпретация результатов бактериологических исследований:
    - количество мезофильных аэробов и факультативных анаэробов не должно превышать 150 колоний с 3-х флаконов, 5-ти пробок, 5-ти прокладок (т.е. в 10 куб. см смывной жидкости);
    - бактерии группы кишечной палочки не допускаются. 3.5. Методика исследования воздуха.
   Доставленные чашки с посевами на питательном агаре и желточно-солевом агаре инкубируют в термостате при 37°С в течение 24 часов, посевы на желточно-солевом агаре дополнительно выдерживают еще 24 часа пои комнатной температуре.
   Посевы на среде Сабуро инкубируют при температуре 22°С - 3 суток.
   Для определения общей бактериальной обсемененности через 48 часов посевы просматривают, подсчитывают количество выросших колоний и производят пересчет на 1 куб. м .
   Для определения количественного содержания золотистого стафилококка просматривают посевы на желточно-солевом агаре после 48-ми часов инкубации, колонии подозрительные на стафилоккок подсчитывают и проводят идентификацию.
   После идентификации производят пересчет полученных результатов на куб. м воздуха. Приложение 2, 3.
   Для количественного определения плесневых и дрожжевых грибов после 72 часов инкубации подсчитывают количество выросших колоний плесневых и дрожжевых грибов и производят пересчет на 1 куб. м.

4. ИССЛЕДОВАНИЕ СМЫВОВ


   4.1. Ориентировочный перечень объектов, подлежащих контролю методом смывов:
   Рабочее место провизора-технолога.
   Стол для приготовления инъекционных растворов.
   Стол для приготовления глазных капель.
   Весы для взвешивания сухих веществ у провизора - технолога.
   Тара для хранения прокладок и пробок, используемых для укупорки инъекционных растворов и глазных капель.
   Ступки.
   Пластинки пластмассовые.
   Весы роговые.
   Кран водопроводный в ассистентской. Руки персонала. Полотенце. Сан.одежда.

   4.2. Объем исследования:
    - определение бактерий группы кишечных палочек;
    - определение патогенных стафилококков (по показаниям).
   4.3. При анализе смыва на наличие бактерий группы кишечной палочки тампон помещают в среду Кесслера. Дальнейший ход исследования и идентификацию проводят по общепринятой методике исследования см. пункт 3.2.2.
   4.4. Определение наличия патогенных (золотистых) стафилококков осуществляют путем посева тампона в пробирку с 5 куб. см 6,5% солевого бульона.
   Дальнейший ход исследования проводят согласно приложению N 2 к приказу N 155 от 30.04.1995 МЗ РУз.
   4.5. Интерпретация результатов.
   Бактерии группы кишечной палочки и патогенные стафилококки в смывах не допускаются.

5. ИССЛЕДОВАНИЕ НА СТЕРИЛЬНОСТЬ


   Для контроля стерильности лекарственных средств применяют тиогликолевую среду и жидкую среду Сабуро. При этом используют метод прямого посева на питательные среды.
   Метод прямого посева. Исследуемый препарат в количестве 1 мл засевают на вышеуказанные среды 1:4. При испытании лекарственных средств посевы в тиогликолевой среде ингибируют при температуре 37°С, а в среде Сабуро - 22°С.
   Количество испытуемого препарата для посева в зависимости от объема содержимого единиц (ампул, флаконов и др.), составляющих серию



Объем содержимого одной единицы, мл
Объем лекарственного средства для посева, мл
Объем питательной среды
Менее 1 Весь объем 1:4
1-4 1 1:4
5-19 2 1:4
20-100 и более 4 1:4

 

Учет и интерпретация результатов испытания на стерильность



   Посевы просматривают в рассеянном свете ежедневно и по окончании периода инкубации. Наличие роста микроорганизмов в питательных средах оценивают визуально по появлению мутности, пленки, осадка и других микроскопических изменений. Выявленный рост микроорганизмов необходимо подтвердить микроскопированием мазков, окрашенных по Граму.
   Испытуемый препарат считают удовлетворяющим требованиям испытания на стерильность при отсутствии роста микроорганизмов.

6. ИССЛЕДОВАНИЕ НА ПИРОГЕННОСТЬ



   (Согласно инструкции по ГФ XI, том 2, стр. 183 "Испытание на пирогенность")

   Исследования на пирогенность лаборатории ЦГСЭН Республиканского и областного значения проводят только в случаях арбитражных исследований при наличии вивария. В других случаях контрольно-аналитические лаборатории РАО "Дори-Дармон".
   Кратность обследований с отбором проб составляют два раза в год и по показаниям.
   Кратность обследований инъекционных растворов на пирогенность с отбором проб может быть реже, чем два раза в год, при удовлетворительных результатах микробиологических анализов воды для инъекций, при удовлетворительных данных бактериологического контроля посуды, флаконов, пробок, прокладок и субстанций (сухих лекарственных веществ), используемых при их изготовлении.
   Испытание проводят на здоровых кроликах обоего пола, не альбиносах, массой 2-3, 5 кг, содержавшихся на полноценном рационе. Каждый кролик должен находиться в отдельной клетке в помещении с постоянной температурой. Колебания температуры не могут превышать ±3°С. При уборке клеток и взвешивании животных их оберегают от возбуждения (избегать шума и резких движений).
   В течение недели, предшествующей опыту, кролики не должны терять в массе.
   Взвешивание их проводят до дачи корма не менее 3 раз через день. Животные, теряющие в массе, к опыту непригодны. В течение 3 суток перед испытанием у каждого подопытного кролика измеряют температуру. Измерения проводят ежедневно утром до дачи корма при помощи медицинского ртутного или электротермометра, позволяющего определить температуру с точностью до 0,1°С. Датчик термометра вводят в прямую кишку на глубину 7-9 см (в зависимости от массы кролика) за внутренний сфинктер на время, необходимое для достижения максимальной температуры. Исходная температура подопытных кроликов должна быть в пределах 38,5 - 39,5° С. Животные с более высокой или более низкой температурой для опыта не пригодны. Кроме того, кроликов, впервые предназначаемых для испытания лекарственных средств, проверяют на реактивность путем внутривенного введения 10 мл/кг 0,9% стерильного не пирогенного раствора натрия хлорида, соответствующего требованиям фармакопейной статьи. В случае изменения температуры у кроликов более чем на ±0,4° С животные считаются непригодными для опыта.
   Не позднее, чем за 18 ч до опыта кроликов переводят в помещение, в котором осуществляют испытание на пирогенность. Оно должно проводиться в отдельной комнате с постоянной температурой, не отличающейся от температуры помещения, в котором кролики постоянно содержались до опыта, более чем на ±2°С, и с колебаниями во время испытания, не превышающими 2°С, изолированной от шума, в спокойной обстановке. Вечером накануне опыта у животных отбирают остаток корма. До и во время опыта животные корма не получают (воду дают без ограничения).
   Если нет других указаний в частной статье, для испытания отбирают не менее 2 флаконов или ампул от каждой серии, содержащей от 1000 до 10000 флаконов или ампул. При количестве в серии флаконов или ампул более 10000 отбирают по 3 флакона или ампул от каждой серии. Из отобранных флаконов или ампул готовят общий раствор (смешанная проба). От серии, содержащей до 1000 флаконов или ампул, для испытания отбирают по 1 флакону или ампуле.
   Вода для инъекций или другие применяемые растворители, а также шприцы и иглы должны быть стерильными и не пирогенными. Испытуемые лекарственные средства должны быть стерильными. Их вводят кроликам в ушную вену. Другие пути введения указывают в частной статье на лекарственное средство. Для каждого кролика берут отдельную иглу. Растворы испытуемых лекарственных средств, подогретые до 37°С (при отсутствии других указаний в частных статьях), вводят в количествах и растворителях, предусмотренных соответствующими частными статьями (Гф XI, том 1). Для испытания на пирогенность воды для инъекций предварительно готовят из нее изотонический 0,9 % раствор натрия хлорида. Натрия хлорид должен быть стерильным и не пирогенным, что обеспечивается воздушным методом его стерилизации при температуре 180 или 200°С в течение от 30 . до 60 мин в зависимости от массы образца. Шприцы, иглы и необходимую стеклянную посуду стерилизуют этим же методом при температуре 180°С в течение 60 мин. Количество вводимого изотонического 0,9% раствора натрия хлорида составляет 10 мл на 1 кг массы кролика. Все количество раствора, предварительно нагретого до 37°С, вводят в течение 2 мин.
   Испытуемый раствор проверяют на 3 кроликах.
   Группа должна состоять из животных, близких по массе (отличающихся не более чем на 0,5 кг.). Перед введением раствора у кролика дважды с интервалом 30 мин измеряют температуру. Различия в показателях температуры не должны превышать 0,2°С. В противном случае кролик для испытания не используется. Результат последнего измерения принимают за исходную температуру. Раствор вводят не позднее чем через 15-30 мин после последнего измерения температуры.
   Последующее измерение температуры при внутривенном введении испытуемого раствора проводят 3 раза с промежутками в один час. При других путях введения - 5 раз с промежутками в один час, если в частной статье нет других указаний.
   Воду для инъекций или раствор лекарственного средства считают не пирогенными, если сумма повышений температуры у 3 кроликов меньше или равна 1,4°С. Если эта сумма превышает 2,2°С, то воду для инъекций или раствор лекарственного средства считают пирогенными. В случаях, когда сумма повышений температуры у 3 кроликов находится в пределах от 1,5 до 2,2°С, испытание повторяют дополнительно на 5 кроликах. В этом случае воду для инъекций или раствор лекарственного средства считают не пирогенными, если сумма повышений температуры у всех 8 кроликов не превышает 3,7°С. Если же эта сумма равна 3,8°С или больше, воду для инъекций или раствор лекарственного средства считают пирогенными.
   В частной фармакопейной статье могут быть указаны другие пределы отклонения температуры.
   Если в частной статье на лекарственное средство нет других указаний, случаи понижения температуры у кроликов принимают за нуль.
   Кролики, бывшие в опыте, могут быть использованы для определения пирогенности повторно, но не ранее чем через 3 суток, если введенный им до этого раствор лекарственного средства или вода для инъекций были не пирогенными. Если же введенный раствор лекарственного средства или вода для инъекций оказались пирогенными, кролики могут быть использованы для дальнейших опытов через 2 нед. При повышении температуры у кроликов в подобных случаях на 1,2°С и более они используются через 3 нед. Если исследуемые вещества обладают антигенными свойствами, то одних и тех же кроликов нельзя использовать для испытания повторно (если нет специальных указаний в частной статье).

   Примечания. На основании опыта контроля на пирогенность медицинских иммунобиологических препаратов (МИБП) допускаются следующие особенности при испытании этих препаратов.
   1. Испытание МИБП проводят на кроликах массой 1,5-2,5 кг.
   2. Проверка реактивности кроликов является необязательной.
   3. Термометр вводят в прямую кишку на глубину 5-7 см (в зависимости от массы кролика).
   4. Понижение температуры учитывают так же, как ее повышение.
   5. Кролики, бывшие в опыте, могут быть использованы для определения пирогенности повторно (но не более 3 раз) с интервалом 2-3 суток, если ранее введенный препарат был не пирогенным. Если введенный препарат оказался пирогенным, кролики не могут быть использованы повторно.

7. ДРУГИЕ ИССЛЕДОВАНИЯ



   7.1. Исследования на синегнойную палочку.
   При исследовании воды очищенной инъекционных растворов до стерилизации, глазных капель, смывов с аптечного стекла, инвентаря, оборудования и рук персонала иногда отмечается рост синегнойной палочки, для выделения которой специальные посевы можно не производить, так как рост их колоний удается обнаружить на среде Эндо или питательном агаре. На среде Эндо колонии плоские желтовато-красные, без металлического блеска, со специфическим запахом. На питательном агаре колонии расплывчатые, с просвечивающим краем; среда приобретает зеленоватый цвет. При окраске по Граму палочки грамоотрицательные. С целью обнаружения способности продуцировать пигмент, культуры изучают на питательном агаре с добавлением 2% глицерина или маннита.
   Идентификация синегнойной палочки проводится по следующим тестам:

    - положительная реакция на оксидазу;
    - рост на среде Симмонса;
    - разжижение желатина;
    - рост на бульоне при температуре 42°С;
    - отсутствие роста на среде с содержанием хлорида натрия 6,5%.

   7.2. Исследование воды очищенной лекарственных средств на бактерии рода Протея.
   Специального посева для выявления этих бактерий можно не проводить, т. к. их удается обнаружить на среде Эндо в виде ползучего вуалеобразного роста. В случае выделения бактерий рода Протея необходимо проводить их видовую идентификацию с применением среды Гисса с мальтозой и изучением способности образовывать индол. Эти тесты дают возможность идентифицировать протеус вульгарис и протеус мирабилис.

ПРИЛОЖЕНИЕ N 1



НОРМАТИВЫ
предельно допустимого содержания непатогенных микроорганизмов в лекарственных формах аптек



N N
п. п.
Наименование
Предельно допустимое содержание микроорганизмов в 1 куб. см
Примечание
1. 2 3 4
1. Растворы для инъекций до стерилизации, не позднее 1-1,5 часов после изготовления    
1.1 Глюкозы 5% и 40%    
1.2 Натрия хлорида 0,9%    
1.3 Новокаина 0,25% и 2%    
1.4 Натрия хлорида 5,0
Калия хлорида 0,07
Кальция хлорида 0,12
Новокаина 2,5
Воды для инъекций до 1000.0
20-30 в виде исключения до 50  
1.5 Рингеры - Локка    
1.6 Сергозина 40%    
2. Глазные капли    
2.1 Раствор сульфацила растворимого (альбуцида натрия) 20% и 30%    
2.2. Раствор атропина сульфата 1% 5-7  
2.3. Раствор дикаина 1%    
2.4. Раствор этилморфина гидрохлорида (дионина) 1%    
2.5. Раствор калия йодида 2%    
2.6. Раствор синтомицина 0,25    
2.7. Раствор цинка сульфата 0,25%
Борной кислоты 2% - 10,0
   
2.8. Раствор цинка сульфата 0,25 -10,0    
2.9 Раствор пилокарпина гидрохлорида 10-15  
2.10 Раствор прозерина 0,25    
2.11 Раствор рибофлавина 0,001 (0,002)
Аскорбиновой кислоты 0,05 (0,03)
глюкозы 0,2
воды дистиллированной 10,0
   
3. "Вода очищенная", полученная дистилляцией, ионным обменом, обратным осмосом и другими способами, применяемая для приготовления не инъекционных лекарственных средств (фс 42 -2619-89 и УзГосстандарта-950-2000 "питьевая вода" Не более 100  
4. "Вода для инъекций" для изготовления стерильных растворов сразу же после перегонки или получения (фс 422620-89) 10-15  
5. "Вода для инъекций", после ее стерилизации, используемая для изготовления асептическим способом глазных капель и концентрированных растворов (концентратов) 0-3  
6. Субстанции (сухие лекарственные вещества), используемые для приготовления инъекционных растворов 100  


   Содержание кишечной палочки, протея и синегнойной палочки в воде очищенной и других лекарственных формах не допускаются.

   Примечание. Специального исследования на синегнойную палочку и протей не производят. Определяют их по ходу других исследований.

ПРИЛОЖЕНИЕ N 2



РАСЧЕТ
числа микроорганизмов в 1 куб. м воздуха при заборе материала седиментационным методом



   1. Определяют среднеарифметическое число колоний, выросших на двух чашках (общее число выросших колоний на двух чашках суммируют и делят на два)
   2. Определяют ОМЧ в 1 куб. м воздуха по формуле Омелянского В.Л., где:
   а - среднеарифметическое число колоний на чашке
   s - площадь чашки Петри кв. см
   т - время экспозиции в мин.
   б - экспозиция чашек по Омелянскому (за 5 мл на чашку Петри площадью 100 кв. см оседает столько микроорганизмов, сколько их содержится в 10 л воздуха)
   100 - пересчет площади чашки на 100 кв. см. 100 - перерасчет на 1 куб. м воздуха. X - ОМЧ в 1 куб. м воздуха. X = ((ax100x5)/SxT)x100. Удобно пользоваться таблицей расчета числа бактерий в 1 куб. м воздуха по В.Л. Омелянскому.

Таблица расчета числа бактерий в 1 куб. м воздуха В.Л. Омелянского



N
п. п.
Диаметр чашки
Площадь чашки, в кв. см
Множитель
1. 8 50 100
2. 9 63 80
3. 10 78 60
4. 11 95 50
5. 12 130 45


   Пример пересчета КОЕ/ОМЧ в 1 куб. м при использовании седиментационного метода за 10 мин экспозиции.

   1. На двух чашках выросло за 10 мин:
   1) 17 кол 30:2 = 15 кол
   2) 13 кол

   2. Диаметр используемых чашек 10 см.

   3. Площадь чашки = 78 кв. см

   4. Множитель = 60

   5. 15 выросших колоний X 60 = 900 КОЕ в 1 куб. м воздуха. При вычислении St.aureus расчет тот же, только учитываются колонии идентифицированные как St.aureus.
   Седиментационный метод является сугубо ориентировочным, и количество микроорганизмов посчитанное по формуле или таблице Омелянского, как правило, в три раза меньше цифр, полученных при использовании аппарата Кротова.
   Поэтому, при оценке воздуха этим методом, основное значение имеют не сами показатели КОЕ, а их динамические изменения в процессе наблюдения.

ПРИЛОЖЕНИЕ N 3



КРИТЕРИИ
оценки микробной обсеменности воздуха помещений аптек



N
Наименование помещений
Условия работы
Общее количество микроорганизмов в 1 куб. м воздуха
Кол-во золотистого стафилакокка в 250 л воздуха
Кол-во плесневых грибов и дрожжевых грибов в 250 л воздуха
1 Асептический блок До работы Не выше 500 Не должно быть Не должно быть
После работы Не выше 1000 Не должно быть Не должно быть
2 Ассистентская, фасовочная, дефектарная, материальная До работы Не выше 750 Не должно быть Не должно быть
После работы Не выше 1000 Не должно быть Не должно быть

 

ПРИЛОЖЕНИЕ N 4



Соблюдение режима стерилизации



   К растворам для инъекций в нормативно-технической документации предъявляется ряд требований, в том числе, должны быть стерильными и апирогенными (т.е. должны отсутствовать пирогенные вещества - это продукты жизнедеятельности и распада микроорганизмов. Применение для инъекций лекарств, обсемененных микроорганизмами, даже после предварительной стерилизации может вызвать у больного пирогенную реакцию повышение температуры, озноб, т.д.)
   Стерильность инъекционных растворов, простерилизованных в автоклавах, например, при показании его манометра в 1,1 атм. экспозиции 15 минут не всегда бывают качественной. Это происходит потому, что в процессе стерилизации из стерилизационной камеры автоклава недостаточно продувается воздух. При этом в стерилизационной камере температура достигает лишь до 102°С, вместо 121°С.
   Чтобы улучшить надежность работы паровых и сухожаровых стерилизаторов, необходимо регулярно проводить - "Определение качества работы стерилизаторов" приглашением работников санитарно-эпидемической службы, и с использованием контрольных средств технических максимальных термометров, термопар, биотестов или новейших индикаторов стерилизации (ИСТ, ИСТЭ).
   Регулярность определения качества работы стерилизаторов:

    - после монтажа;
    - после каждого их, ремонта;
    - после обнаружения не стерильных материалов;
    - и планово - два раза в год.

   Кроме того, оператору стерилизационных аппаратов необходимо контролировать каждый сеанс стерилизации с использованием новейших индикаторов стерилизаций температурно-экспозиционных, ИСТЭ-110-121-132-180, утвержденных МЗ РУз от 16.02.1998 г. N 012-606.
   Индикаторы плавления (тиомочевина, сера, бензойная кислота, сахароза и др.) из практики исключены.
   В аптеках можно добиться изготовления апирогенных растворов для инъекций при качественной дезинфекции и стерилизации предметов, применяемых в технологии изготовления инъекционных растворов.
   Эффективность стерилизации может быть нарушена из-за:

    - недостаточной продувки воздуха из стерилизационной камеры автоклава;
    - плотной укладки стерилизуемых материалов в биксы и в стерилизационные камеры парового и сухожарового стерилизаторов (это можно определить использованием индикаторов стерилизации ИСТЭ-121 и ИСТЭ-180);
    - нарушения санитарного режима;
    - использования бактерицидных ламп с просроченным сроком службы при стерилизации воздуха в комнатах, где изготавливаются стерильные лекарственные средства. Лампы БУВ - 15 и БУВ - 60 имеют срок службы до 3000 часов, ДБ 30-1 - до 5000 часов). Это можно определить по журналу регистрации каждого сеанса включения и паспорта на лампу.

   Для устранения вышеизложенных причин, которые могут привести к некачественной стерилизации лекарственных средств, оператору стерилизационных аппаратов необходимо пройти специальный курс обучения по обслуживанию стерилизационных аппаратов, и иметь допуск к работе с ними. А также пройти курс обучения по стерилизации лекарственных средств и других предметов, используемых при изготовлении инъекционных растворов, и иметь соответствующее удостоверение.

ПРИЛОЖЕНИЕ N 5



ПИТАТЕЛЬНЫЕ СРЕДЫ,
применяемые для контроля стерильности (индивидуальное приготовление)



   Для контроля стерильности применяют "Сухую питательную среду для контроля стерильности" (тиогликотилевую) (ТУ 42.14 N 161-79) и среду Сабуро (жидкую). Вместо коммерческой тиогликолевой среды может быть использована тиогликолевая среда индивидуального приготовления. Состав и приготовление питательных сред. Тиогликолевая среда индивидуального приготовления:
   панкреатического гидролизата казеина 15,0 г
   дрожжевого экстракта (10%) 5,0 г
   натрия хлорида 2,5 г
   глюкозы 5,0 г
   цистина (цистеина) 0,75 г
   тиогликолевой кислоты или 0,3 мл
   тиогликолий натрия 0,5 г
   раствора резазурина натрия 1:1000
   (свежеприготовленного) 1,0 мл
   агара 0,75
   воды дистиллированной до 1000 мл рН после стерилизации 7,0±0,2
   Допускается приготовление среды без резазурина натрия
   Тиогликолевую среду можно хранить в течение 14 суток со дня приготовления при температуре от 10 до 25°С в защищенном от света месте.
   В случае если при хранении среды, содержащей резазурин, верхний слой среды (более 1/3 объема) окрасится в розовый цвет, среду можно регенерировать нагреванием на кипящей водяной бане в течение 10-15 мин до исчезновения розовой окраски с последующим быстрым охлаждением. В случае если окраска не исчезает после нагревания, среду считают непригодной к употреблению. Регенерацию среды можно проводить только один раз.

    - Среда Сабуро

   пептона ферментативного 10 г
   Глюкозы 40 г
   Воды дистиллированной до 1000 мл
   РН после стерилизации 5,6 ±0,2
   Обе среды стерилизуют насыщенным паром при избыточном давлении 0,11 ±0,02 МПа (1,1 ±0,2 кгс/кв. см) и при температуре (121±1) °С в течение 15 мин.

ПРИЛОЖЕНИЕ N 6



При составлении инструкции использованы следующие нормативно-методические материалы:



   1. СанПиН N 0078-98 МЗ РУз от 16.01.1998 г.
   2. Методические указания по микробиологическому контролю в аптеках, утвержденные Минздравом N 3182-84 от 29.12.1984 г.
   3. Государственная фармакопея, одиннадцатое издание, выпуск 2, (ГФ XI) 1990г.
   4. Методические указания по контролю работы стерилизаторов с использованием индикаторов стерилизации ИСТ и ИСТЭ -120-132 -16 - 180°С, утвержденные МЗ РУз от 16.02.1998 г. N 012-6406.
   5. Методические указания по контролю работы паровых и воздушных стерилизаторов, утвержденные Минздравом РУз 28.02.1991 г. N 15X6-5.
   6. Методические указания по изготовлению стерильных растворов в аптеках, утвержденные Минздравом РУз от 09. 01.1991 г.
   7. ФС 42-2619-89. "Вода очищенная". 1989 г.
   8. ФС 42-2620-89 "Вода для инъекций". 1989 г.
   9. УзГосстандарт-950-2000 "Вода питьевая".
   10. Приказ МЗ РУз N 155 от 30.04.95 г.
   11. Методы микробиологического контроля лекарственных средств, утвержден МЗ РУз 13.10.1998 г.
   12. Метод. рекомендации по контролю стерилизации, утверждены МЗ РУз 30.11.1979 г.

ПРИЛОЖЕНИЕ N 7



ПЛАН-СХЕМА микробиологического исследования



 
Вода очищенная
для лекарственных форм
для приготовления инъекционных растворов и глазных капель
Материал для исследования Берут 500 мл.
Требование ГОСТа 950 - 2000
Отбирают в количестве 1 единицы до 450 мл в емкостях, в которых осуществляется стерилизация
Метод исследования 1. Определение КОЕ МАФАМ
По 1 мл воды в две чашки + 12 мл МПА заливают: t° 37° - 24 часа и 24 часа при комнатной температуре.
Учет и подсчет колоний с лупой.
Выводят среднее арифметическое в 1 мл.
2. Плесневые грибы
Посев по 0,5 млх2 чашки, заливают Сабуро агаром t° -22°-72 часа
Подсчет числа колоний в двух чашках в одном мл.
Затем, количество колоний МАФАМ в одном мл + плесневые грибы в 1 мл = числу выросших колоний в одном мл воды.
3. Определение Килииндекса
По ГОСТ 950-2000 РУз засевают :
3 объем х 100 мл на ГПС
3 объем х 10 мл на ГПС
3 объем х 1,0 мл на ГПС
Определение КОЕ МАФАМ
Наличие БГКП в 1,0 куб. см 9 куб. см в 1% ГПС +1 куб. см исследуемой воды при t° 37° - 18 ч.
Высев на Эндо t° 37° '18 ч.
Подозрительные колонии изучают в мазке, окрашивают по Граму.
При наличии Гр-палочек засевают в ГПС с поплавком t° 37° - 18 ч.
Наличие К + Г + говорит о присутствии БГКП.
Количественное определение БГКП в 1 мл или гр.
1 мл помещают в чашку, заливают средой Эндо t°37° 18 ч. Считают количество выросших колоний, подозрительных по БГКП.
В результате указывают количество выросших колоний в 1 мл типичных для БГКП (см. приложение N 2 настоящей инструкции)

 

Продолжение приложения 7



 
Лекарственные вещества
до стерилизации
после стерилизации
Сухие
Материал для исследования Отбирают во время приготовления не позднее 1,5 часа в тех же флаконах в которых подготавливают для стерилизации. Так же забирают глазные капли и приготовленные асептическим способом Забирают в аптечной упаковке лекарственные вещества и глазные капли Отбирают стерильными ложками в количестве 30-50 грамм
Если таблетки, стерильным пинцетом в банку или колбу.
Метод исследования 1. Определение КОЕ МАФАМ
2.Наличие БГКП в 1,0 куб. см
3. Количество БГКП в одном мл или грамме (см. исследование воды для приготовления инъекционного растворов)
1. Определение стерильности
1) посев на тиогликолиевую среду 1,0- 1,5 мл
Выращивание при t°37°-8 суток
2) посев на среду Сабуро бульон 1,0- 1,5 мл
Выращивание при t°22,5°-8 суток ежедневно просматриваются посевы. Появление мути, пленки, осадка говорит о росте микроорганизмов. Делают мазок, окрашивают по Граму, микроскопируют. Выписывают результат с характеристикой выросших микроорганизмов.
Если лекарственные формы дают плохие результаты до стерилизации, то исследуют сухие вещества. Приготавливают разведения общепринятых доз для данного лекарственного вещества.
Например: 5% р-р глюкозы, 0,9% р-р хлорида натрия и т.д. и р-р подвергают исследования. По пункту лекарственные вещества до стерилизации.

 

Продолжение приложения 7

 

 
Посуда
Воздух
Пробки, прокладки, флаконы и прочее
 
Материал для исследования Забирают:
1) 3 флакона одинаковой емкости, укупоренные пробками.
2) 5 шт пробок стерильным пинцетом помещают в стерильную банку
3) 5 шт прокладок и др. вспомогательный материал
Забирают:
1) в стерилизационном асептическом блоке
2) ассистентской
3) фасовочной
4) материальной
5) отбор проб производят на уровне рабочего стола при закрытых форточках и дверях
Метод исследования Флаконы 3 шт. ополаскивают 10 куб. см стерильной воды (то же делают прокладки и т.д.)
Определяют:
1) количество МАФАМ в 1 куб. см, число колоний в 1 куб. см умножают на 10, т.е. определяют число колоний во всей смывной жидкости
2) наличие БГКП 8 куб. см смывной жидкости засевают в 1 куб. см 10% ГПС, t° 37° 18 часов и далее по схеме .
Результаты:
Количество МАФАМ не должно превышать 150 колоний с 3-х флаконов, 5 пробок, 5 прокладок (т.е. в 10 куб. см смывной жидкости)
Аппаратом ПБА-818
На ОМЧ на 2% питат. агар
При 25 л в 1 мин - 4 мин - 100л
2) На St. aureus-ЖСА - 10 мин-250 л. t°37°-24 ч. и 24 часа при комнатной температуре.
3) На плесневые грибы - на агар Сабуро -10 мин -250 л t° 22°- 72 ч.
При исследованиях по эпидпоказаниям на гр- флору (сальмонеллы) чашки держат открытыми 2-4 часа.
Седиментационный метод допускается при отсутствии аппарата для отбора проб воздуха на МПА-10 мин на ОМЧх2 чашки
На ЖСА - 45 мин х 2 ч
Интерпретация результатов см. инструкцию Приложение N 1, 2

 

Продолжение приложения 7



 
Смывы
Материал для исследования Берут: с рабочего места провизора тампоном на среду Кесслера.
Со стола для приготовления инъекционных растворов.
Стол для приготовления глазных капель, весы для сухих в-в, тара для хранения прокладок, пробок, используемых для укупорки растворов и капель, ступки, пластмассовые пластинки.
Метод для исследования Весы роговые, кран водопроводный в ассистентской, руки персонала, полотенце, сан. одежда.
Определяют:
1) БГКП на среде Кесслера.
2) Определение наличия золотистого стафилококка по показаниям. Смыв берут в 5 мл 6,5% солевого бульона - t° 37°- 18 ч - высев на чашку с ЖСА Пр. N 155 от 30.04.1995 МЗ РУз.
БГКП в смывах не допускается
St. aureus в смывах не допускается



Справочник "Фармацевтическая деятельность в Республике Узбекистан",
Ташкент, Издательство имени Абу Али ибн Сины, 2003 г.

 


Товар сертифицирован. Услуги лицензированы


Просмотров: 34272
В этой теме действует премодерация комментариев.
Вы можете оставить свой комментарий.
Гость_
Антибот: Антибот
- Сайт модерируется. Из комментариев удаляются бессмысленные, оскорбительные или не относящиеся к теме обсуждения.
- При написании комментария вы можете использовать теги BB-кода (BBCode).
Список поддерживаемых тегов.

Яндекс.Метрика Рейтинг@Mail.ru Gorodskidok.uz
Сайт разработан ООО "Norma Hamkor". Все имущественные права на сайт принадлежат ООО "GISinfo".
Адрес: 100105, Узбекистан, г. Ташкент, ул. Таллимарджон, 1/1
Тел.: (998 71) 283-39-26; факс: (998 71) 283-39-23
E-mail: info@apteka.uz , admin@apteka.uz
Любое копирование материалов сайта возможно только с активной гиперссылкой на www.apteka.uz
Все товары, подлежащие обязательной сертификации, сертифицированы; лицензируемые услуги – лицензированы.
© ООО «GISinfo»; 2013. Все права защищены.